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养这东西可比乌龟省劲儿多了,他再也不用每天提着个水泵上一楼的塘子里去换臭水了。火焰龟,能吃能拉能打架。自从开始批量养殖,他一天安稳日子都没过过,要么劝架、要么分池、要么治伤。繁殖期时还得天天举着个手电筒照蛋,把胎停的给拣出去。
他的手本来是和楼下那位姑娘一样稳的,可干过这些粗活之后却再也回不到从前了。
等把这波龟卖完,只留下金哥。以后每天睡到自然醒,下楼喂喂蜥蜴,上院子里逗逗金哥。无聊了就上细胞间随便测测序,找到一些有意思的基因位点,敲入一个新基因或者把原基因敲出,得到长得更加花里胡哨的物种。在这个时候,他就是上帝!
他边想边举起手,幻想自己正拿着微针把混合着RNP的淡红色缓冲液注入到蜥蜴肚子里圆圆滑滑的卵母细胞中。
在他看来,微针是世界上最帅的东西。
因为那是上帝的手术刀。
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[1]RNP:核糖核蛋白复合物。是向导RNA和Cas蛋白的复合体,向导RNA可以找到要剪的基因片段的位置,Cas蛋白可以把DNA剪断。
[2]腺病毒:一种无外套膜的双链DNA病毒,有很高的基因包装能力,常作为基因编辑载体。
[3]CRISPR:成簇的规律间隔的短回文重复序列。将它配合上相关的核酸内切酶(简称Cas)就可以切割DNA。CRISPR-CAS技术与锌指核酸酶技术、“神话”核酸酶(TALEN)技术并称基因编辑三大“剪刀”。
[4]脱靶:CRISPR-CAS的识别序列通常是20个左右碱基对,相对于生物的DNA很短,这种短碱基片段在DNA长链中随处可见。所以用它剪切DNA的时候,可能也同时剪掉了非靶标位点,造成各种乱七八糟的突变,导致细胞死亡。
其次,CRISPR-CAS对错误的容忍度比较高,即便某一段碱基片段与靶标片段不完全一致,也能发挥剪切作用,造成脱靶。总之,只要是剪错了地方,就叫做脱靶。
再者,CAS发挥作用时,需要靶标基因的上游存在一个特定的短的碱基序列,称之为PAM序列(对于最广泛使用的CRISPR-CAS9,一般为NGG,其中N为任意一种碱基)。如果实际操作中靶标基因片段上游到处都没有PAM序列,则CRISPR-CAS系统无法发挥剪切作用。这种情况也可以叫做脱靶。
